双光束紫外可见分光光度计是依据物质在紫外、可见光区的吸收光谱特性和朗伯-比尔定律的原理,对物质进行定性定量分析的仪器&,器广泛应用于石油’医药、化工、卫生防疫等部门。为确保仪器出具数据准确可靠,必须经过计量
部门的周期检定,对使用频率高对仪器技术指标要求高的部门,要经常对仪器进行校准。
1、双光速紫外可见分光光度计使用过程要经常进行基线校正:对仪器进行各项校准前一定要校准基线。不同的仪器操作不同,有的是点“baseline”有的是点“zero”还有其他操作方法。
2、基线平直度的测量:做完“校准基线”后即测量此项指标。要想得出准确的结果,条件设定很关键,选择光度计的“波长扫描”功能,波长范围:全波段;带宽:2nm;扫描速度:中速;纵坐标范围的设定也很重要,单位选择“透射比”,可设定为95%-105%或98%-102%,以便清晰看出100%线的变化。
3、波长准确度与重复性的测量:目前国际上使用的标准有汞灯、氧化钬溶液或氧化钬滤光片,这些标准都有较丰富的光谱峰,选用仪器的“波长扫描”功能,宜用扫描速度慢,相应时间小,这样可以避免附加误差。要特别注意“采样间隔”的设定,为了准确得出峰值波长的数据,宜采用“0.1nm”但有的无法设定“采样间隔”,“波长范围”的起始波长与终止波长相隔不超过200nm才能得出准确的峰值数据,想要把氧化钬滤光片的特征峰235-640nm扫描一遍,要分三段设定。大部分仪器可以直接设定所要的“采样间隔”
4、透视比准确度和重复性的测量:操作上使用仪器的“定量测量”功能,用户使用仪器的该项功能较多,尽量选用“多波长测量”。为保证测量准确,应正确使用标准溶液:
1)对测量用吸收池的要求,采用光径长度为10.00mm的石英池盛装标准溶液,吸收池的两透光面应无划痕、油渍或液体污染,否则会产生一些散射光甚至荧光干扰测量,安装吸收池至样品框架上应遵循一定的方向,可按吸收池箭头所标方向正对入射光方向,以减少吸收池两透光面的不平行性带来的误差。
2)必须事先对仪器波长进行校准后,才能使用标准溶液测量透射比准确度。