光度分析法对于水质分析化学工作者说是亚硝酸盐氮定量分析的最有用的工具之一,它应用性广泛,灵敏度高,选择性强,使用的浓度范围很高,并且分析成本低,操作简单,快速。目前能用直接法或间接法测定金属和非金属70多种,所涉及水样包括雨水、泉水、井水、饮用水、江水、湖水、河水、海水以及各种废水。
随着现代科学技术的发展和进步,分光光度计的测试手段和方法都在不断改进,但它的基本原理是根据比尔-朗伯定律,测定样品溶液或加一定试剂显色的样品溶液的吸光度,即被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比。
仪器和试剂:SP-752紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)、亚硝酸钠、磷酸、对氨基苯磺酰胺
测定过程:在SP-752型紫外可见分光光度计上于450nm-750nm区域内自动扫描,数据以吸光度方式输出,扫描步长0.2nm。结果是在542.0nm处有最大吸收,这与方法中的540.0nm很接近。扫描时要选择尽可能小的谱带宽度,扫描速度不宜过高。
使分光光度计经常处于良好的工作状态注意的问题:电源匹配及接地线,由于外部电源的质量对仪器的工作稳定性有极大关系,所以要配备交流稳压设备,放置电网波动对仪器的影响。若不接良好地线,仪器的金属部位可能带电,仪器会因此造成输出信号不稳,同时数据跳动率大,因此使用仪器前必须对电源的接地线做检查。
打开主机电源以后,主机将自动做一系列自检工作,自检结束后要预热20分钟,才可以进行样品测定,查看光斑是否在关闭的入射狭缝内。
控制仪器的温升:如果仪器连续使用超过3个小时,光源产生的热量经扩散或传导至仪器的其他部位,会给测量带来误差,如果比色皿室的温度上升,容易在比色皿内壁生成微小气泡,导致错误的测量结果,读数不稳定,因此仪器没用3小时左右,最好关机休息30分钟。
为保证样品的分析质量,要求紫外可见分光光度计稳定可靠是非常必要的。最基本的要求就是能准确的获得样品在特定波长下的吸光度值,或者是样品在特定光谱波长下的吸光度值变化曲线图。