紫外可见分光光度计线性度测试方法

    紫外可见分光光度计是一种很重要的分析仪器，在使用一台新的紫外可见分光光度计仪器前，一般需要先对仪器的线性度进行测试。但大多数使用者只是在某一试样的某一浓度附近，用浓度的倍数变化来测出这一段的线性度。这只能反映仪器在小范围内的使用情况，并不能说明仪器的线性度是否符合出厂指标，也不能反映仪器的线性范围。因此，在仪器使用前对其线性度的测试有着重要的意义。

   紫外可见分光光度计工作原理：比尔在研究了各种无机盐的水溶液对红光的吸收情况后指出，光的吸收和光所遇到的吸光物质的数量有关，如果吸光物质溶于不吸光的溶剂中，则吸光度和吸光物质的浓度成正比。即当单色光通过液层厚度一定的有色溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比，这就是比尔定律。

   紫外可见分光光度计主要由光源系统、单色器系统、样品室、检测系统组成。紫外可见分光光度计的技术指标主要有11个，即波长准确度、波长重复性、光度准确度、光度重复性、杂散光、光谱带宽、基线平直度、稳定性、光度噪声、线性度、线性动态范围。除了线性动态范围，其他的技术指标一般都在仪器指标中写出明确的测量方法及要求。紫外可见分光光度计的线性度在定量分析工作中有着极其重要的意义，如果仪器的线性度很差，就不可能得到好的定量分析结果。

   分光光度计线性度测试的方法很多，常用的方法大致有：

1、溶液稀释法：将重铬酸钾稀释到不同浓度，测量不同波长处的吸光度（一般需测85个吸光度值），然后根据此数据作曲线，判断线性度。

2、中性滤波片法：一般以3块中性滤波片叠加，比较测定值与计算值之差来判断线性度。

3、百分法：使被测试样浓度成倍增加，测其吸光度并作曲线，判断实验值偏离比尔定律直线部分的程度。

4、改变池厚法：用不同厚度的样品池来测量重铬酸钾的吸光度，以此观察光度计的线性度。

5、旋转扇形板法：将不同透射率的扇形板置于样品光束中旋转，测出各点透射率并与真值进行

比较。

6、光叠加法：利用双孔规来分段测量，然后用曲线判断线性度。