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紫外-可见分光光度计性能评价(二)

2015-09-24 类型:新闻资讯
紫外-可见分光光度计是生物、化学和环保领域中非常重要的研究工具。

    对紫外-可见分光光度计的性能目前尚没有一个通用的定量评价标准,制造厂家很多 ,各公司的产品各有特色

   波长范围 、波长准确度和波长重复性:

   波长范围与光源、单色器及检测器的光谱响应特性有关。一般的波长范围在190~900nm,大多采用R928光电倍增管。若覆盖至1100nm,通常外加一个硫化铅光电倍增管,或采用光电二极管。从覆盖的最低波长来看波长重复性是定性分析的重要因素, 波长位置若不能准确重复 ,就不

能准确判定吸收峰的位置,甚至引起判断错误。

   杂散光:杂散光可使测量结果偏离比尔定律,产生误差,

   基线稳定性和平坦性:双光束分光光度计在扫描100%T或0 A线时(样品室中不放任何东西), 基线的稳定性会影响光度准确度。双光束分光光度计扫描基线时,基线倾斜弯曲的程度,是仪器重要性能指标之一。平直性不良,说明光路不平衡,光学元件位置不准确,反射镜质量下降或电子和机械系统不良。基线的平直性还可用来考察噪音和光源或色散元件切换时的谱线衔接情况等 。平直性不良,会对各个吸收峰值之间的比值产生影响,给物质结构的分析带来困难。

   响应时间的选择:响应时间的选择取决于样品的性质、所选择的狭缝宽度和信噪比。高吸收样品应选择长的响应时间以减小噪音。但在扫描光谱时,特别在快的扫描速度下,应选用快的响应时间以避免光谱的失真,除非噪音成为问题时,方可增加响应时间,因此仪器的响应速度应可调。

   扫描速度的选择:扫描速度的选择取决于对不同性质样品所选择的谱带宽度和响应时间 . 一般对锐的吸收光谱,应选择慢的扫描速度,以及与噪音协调的快的响应时间。而对宽的吸收光谱,可以采用较快的扫描速度,从仪器的角度来考虑,当然扫描速度越快越好,扫描速度控制的精度越高越好。

   紫外/可见分光光度计还在发展之中 ,如光电技术的发展带动了紫外/可见分光光度计的发展 , 阵列 CCD 检测技术的出现 ,使紫外/可见分光光度计免去了移动部件,有了极高的波长稳定性和重现性。CCD ARRAY 检测器可以在扫描单元中获取单一波长下的全部波谱情况。这种检测器具有高的量子效率,灵敏度极高。因此在吸收测量中只需微弱的光,降低了样品加热和光氧化的可能性。最新的信号处理(DSP) 系统被应用于紫外/可见分光光度计中,可以有效地获取数据。不需操作者调节仪器参数。该系统可以根据样品光密度自动调节检测器的积分时间,大大缩短了获取和显示光谱的时间,同时提高了图像的全真性,该种仪器刚刚制造成功。随着研究领域的不断扩大、分析测试条件的不断深入和其他技术的应用,紫外/可见分光光度计仍在不断的发展之中。不同商家的产品都有自己的特色,在仪器性能的某一方面各有所长。性能指标上的差异 、软件分析功能上的差异、检测器的不同和选配件上的差异都关系着使用者的科研需求。不同的用户强调仪器指标和配置不同,因此全面掌握不同厂家仪器的特色,对于仪器选型、配置,更好地服务于科研具有很重要的作用。

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