双光束紫外可见分光光度计(以下简称仪器)是依据物质在紫外、可见光区的吸收光谱特性和朗伯一比尔定律的原理.对物质进行定性定量分析的仪器。仪器广泛应用于石油、医药、化工、卫生防疫等部门。为确保仪器出具数据准确可靠,必须经过计量部门的周期检定,对使用频率高、对仪器技术指标要求高的部门.要经常对仪器进行校准。
1 校准基线
仪器使用过程要经常进行基线校正,对仪器进行各项校准前一定要校准基线。不同的仪器操作不同,有的是点“baseline”,有的是点“zero”,还有其它操作方法。
2 基线平直度的测量
做完“校准基线”后即测量此项指标。要想得出准确的结果,条件设定很关键,选择仪器的“波长扫描”功能,波长范围:全波段;带宽:2 nm;扫描速度:中速;纵坐标范围的设定也很重要,单位选择“透射比”,可设定为95%一105%或98%一102% 。以便清晰看出100%线的变化。
3 波长准确度与重复性的测量
目前国际上使用的标准有汞灯、氧化钬溶液或氧化钬滤光片,这些标准都有较丰富的光谱峰,选用仪器的“波长扫描”功能。宜用扫描速度慢,响应时间小.这样可以避免附加误差。要特别注意“采样间隔的设定.为了准确得出峰值波长的数据,宜采用“0.1nm ”
4 透视比准确度和重复性的测量
操作上使用仪器的“定量测量”功能。用户使用仪器的该项功能较多,尽量选用“多波长测量”。为保证测量准确,应正确使用该标准溶液:① 对测量用吸收池的要求采用光径长度为10.00一mill的石英池盛装标准溶液.吸收池的两透光面应无划痕、油渍或液体污染.否则会产生一些散射光甚至荧光干扰测量.安装吸收池至样品框架上应遵循一定的方向。可按吸收池箭头所标方向正对入射光方向。以减少吸收池两透光面的不平行性带来的误差。
②必须事先对仪器波长进行校准后,才能使用标准溶液测量透射比准确度。